·加入收藏 ·詢價留言
 
首 頁 公司簡介 產品展示 公司新聞 技術文章 資料下載 人才招聘 聯系我們
產品搜索:
生化試劑
分子生物學試劑
蛋白質研究
免疫學抗體
細胞相關產品
其他試劑及產品
實驗室相關耗材
實驗室服務
sigma產品
Invitrogen
Roche產品
Biovision產品
NUNC耗材
生化檢測試劑盒(常量)
Peprotech細胞因子
OMEGA試劑盒代理
實驗室儀器
葡聚糖凝膠,瓊脂糖凝膠填料系列
中藥對照品 標準品
其他生化試劑
移液器
R&D細胞因子現貨供應
糖類中間體
原料藥
索橋生化檢測試劑(微量)
索橋生化檢測(常量)
透析膜及相關產品
地 址: 上海市徐匯區欽江路15號
郵 編: 200233
聯系人: 馬先生
電 話: 86-021-64855665/86-021-54100800
傳 真: 86-021-54261506
郵 箱: [email protected]
網 址: www.wehhzc.tw
 
塑料包裝
上海索萊寶生物科技有限公司
上海索來寶【丁香通】
上海索萊寶生技網站
上海索寶-慧聚網站
上海索寶生物阿里巴巴站
索橋生物
生技網-搜盡生命科學
索萊寶
SOLARBIO
 
   
NADP-蘋果酸脫氫酶測試盒 微量酶標儀法 說明 技術 文章
點擊次數:251 發布時間:2019-04-02

product-view

NADP-蘋果酸脫氫酶(NADP-MDH)活性檢測試劑盒

商品貨號:MS1003
英文名稱:Micro NADP-Malate Dehydrogenase(NAD-MDH)Assay Kit
別名:NADP-蘋果酸脫氫酶試劑盒 NADP-MDH Kit NADP-蘋果酸脫氫酶(NADP-MDH)試劑盒 NADP-蘋果酸脫氫酶(NADP-MDH)測試盒
檢測方法:微量法

 

商品貨號:商品品牌:規格基本售價選擇規格
MS1003-100管/96樣索橋生物100管/96樣¥600.00元 

測定意義:

MDH (EC 1.1.1.37)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中,線粒體中MDH是TCA循環的關鍵酶之一,催化蘋果酸形成草酰乙酸;相反,胞漿中MDH催化草酰乙酸形成蘋果酸。草酰乙酸是重要的中間產物, 連接多條重要的代謝途徑。因此,MDH在細胞多種生理活動中扮演著重要的角色,包括線粒體的能量代謝、 蘋果酸-天冬氨酸穿梭系統、活性氧代謝和抗病性等。根據不同的輔酶特異性,MDH分為NAD-依賴的MDH和NADP-依賴的MDH, NADP-MDH主要存在于真核細胞中。

測定原理:

NADP-MDH催化NADPH還原草酰乙酸生成蘋果酸,導致340nm處光吸收下降。

 

貨號:MS1003                                                     規格:100管/96樣

NADP-蘋果酸脫氫酶(NADP-MDH)試劑盒說明書

微量法

正式測定前務必取 2-3個預期差異較大的樣本做預測定

測定意義:

MDH (EC 1.1.1.37)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中,線粒體中MDH是TCA循環的關鍵酶之一,催化蘋果酸形成草酰乙酸;相反,胞漿中MDH催化草酰乙酸形成蘋果酸。草酰乙酸是重要的中間產物, 連接多條重要的代謝途徑。因此,MDH在細胞多種生理活動中扮演著重要的角色,包括線粒體的能量代謝、 蘋果酸-天冬氨酸穿梭系統、活性氧代謝和抗病性等。根據不同的輔酶特異性,MDH分為NAD-依賴的MDH和NADP-依賴的MDH, NADP-MDH主要存在于真核細胞中。

測定原理:

NADP-MDH催化NADPH還原草酰乙酸生成蘋果酸,導致340nm處光吸收下降。

自備實驗用品及儀器:

紫外分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。

試劑的組成和配制:

試劑一:提取液100 mL×1瓶,在4℃保存;

試劑二:液體20 mL×1瓶,在4℃保存;

試劑三:粉劑×1瓶,-20℃保存;

樣本測定的準備:

1、細菌、細胞或組織樣品的制備:

細菌或培養細胞:先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細菌或細胞數量(104個):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1mL試劑一),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

組織:按照組織質量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

2、血清(漿)樣品:直接檢測。

測定步驟:

  1. 分光光度計或酶標儀預熱30min以上,調節波長至340nm,蒸餾水調零。

2、檢測工作液的配制:用時在試劑三中加入19mL試劑二和0.5mL蒸餾水,充分混勻待用;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復凍融;

3、測定前將檢測工作液在37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)水浴10min以上。

4、在微量石英比色皿或96孔板中加入5μL樣本和195μL工作液,混勻后立即記錄340nm處20s時的吸光值A1和 1min20s后的吸光值A2,計算ΔA=A1-A2。

注意:若A1-A2大于0.5,需將酶液用提取液稀釋,使A1-A2小于0.5,可提高檢測靈敏度。計算公式中乘以相應稀釋倍數。

NADP-MDH活力單位的計算:

a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下

1、血清(漿)NADP-MDH活力的計算

單位的定義:每毫升血清(漿)每分鐘消耗1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位。

NADP-MDH(nmol/min/mL)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷V樣÷T=6430×ΔA

2、組織、細菌或細胞中NADP-MDH活力的計算:

(1)按樣本蛋白濃度計算:

單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘消耗1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位。

NADP-MDH(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=6430×ΔA÷Cpr

(2)按樣本鮮重計算:

單位的定義:每g組織每分鐘消耗1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位。

NADP-MDH(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V樣÷V樣總)÷T =6430×ΔA÷W

(3)按細菌或細胞密度計算:

單位的定義:每1萬個細菌或細胞每分鐘消耗1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位。

NADP-MDH(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣÷V樣總×500)÷T=12.86×ΔA

V反總:反應體系總體積,2×10-4 L;ε:NADPH摩爾消光系數,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.005 mL;V樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應時間,1 min;W:樣本質量,g;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;500:細胞或細菌總數,500萬。

b.用96孔板測定的計算公式如下

1、血清(漿)NADP-MDH活力的計算

單位的定義:每毫升血清(漿)每分鐘消耗1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位。

NADP-MDH(nmol/min/mL)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷V樣÷T=12860×ΔA

2、組織、細菌或細胞中NADP-MDH活力的計算:

(1)按樣本蛋白濃度計算:

單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘消耗1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位。

NADP-MDH(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=12860×ΔA÷Cpr

(2)按樣本鮮重計算:

單位的定義:每g組織每分鐘消耗1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位。

NADP-MDH(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W× V樣÷V樣總)÷T =12860×ΔA÷W

(3)按細菌或細胞密度計算:

單位的定義:每1萬個細菌或細胞每分鐘消耗1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位。

NADP-MDH(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(500×V樣÷V樣總)÷T=25.72×ΔA

V反總:反應體系總體積,2×10-4 L;ε:NADPH摩爾消光系數,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光徑,0.5cm;V樣:加入樣本體積,0.005 mL;V樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應時間,1 min;W:樣本質量,g;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;500:細胞或細菌總數,500萬。

 

QS1000輔酶ⅠNAD(H)含量測試盒可見分光光度法50管/24樣500
MS1000輔酶ⅠNAD(H)含量測試盒微量法100管/48樣920
QS1001乳酸脫氫酶(LDH)測試盒可見分光光度法50管/24樣170
MS1001乳酸脫氫酶(LDH)測試盒微量法100管/48樣330
QS1002NAD-蘋果酸脫氫酶(NAD-MDH)測試盒紫外分光光度法50管/48樣280
MS1002NAD-蘋果酸脫氫酶(NAD-MDH)測試盒微量法100管/96樣550
QS1003NADP-蘋果酸脫氫酶(NADP-MDH)測試盒紫外分光光度法50管/48樣320
MS1003NADP-蘋果酸脫氫酶(NADP-MDH)測試盒微量法100管/96樣600
QS1004NADH氧化酶(NOX)測試盒  可見分光光度法50管/48樣450
MS1004NADH氧化酶(NOX)測試盒  微量法100管/96樣850
QS1005-50檸檬酸合酶(CS)測試盒可見分光光度法50管/48樣3200
QS1005-25檸檬酸合酶(CS)測試盒可見分光光度法25管/24樣2000
MS1005檸檬酸合酶(CS)測試盒微量法100管/48樣3500
QS1006丙酮酸脫羧酶(PDC)測試盒紫外分光光度法50管/48樣720
MS1006丙酮酸脫羧酶(PDC)測試盒微量法100管/96樣1400
QS1007醇脫氫酶(ADH)測試盒紫外分光光度法50管/48樣280
MS1007醇脫氫酶(ADH)測試盒微量法100管/96樣550
QS1008單脫氫抗壞血酸還原酶(MDHAR)測試盒紫外分光光度法50管/48樣800
MS1008單脫氫抗壞血酸還原酶(MDHAR)測試盒微量法100管/96樣1550
QS1009乙醛脫氫酶(ALDH)測試盒紫外分光光度法50管/48樣420
MS1009乙醛脫氫酶(ALDH)測試盒微量法100管/96樣800
QS1010NAD激酶(NADK)測試盒可見分光光度法50管/48樣600
MS1010NAD激酶(NADK)測試盒微量法100管/48樣1100
QS1011線粒體呼吸鏈復合體Ⅰ/NADH-輔酶Q還原酶測試盒   紫外分光光度法25管/24樣1280
MS1011線粒體呼吸鏈復合體Ⅰ/NADH-輔酶Q還原酶測試盒   微量法100管/96樣2500
上海索寶生物科技有限公司 版權所有 總訪問量:1491786 地址:上海市徐匯區欽江路15號 郵編:200233
電話:86-021-64855665/86-021-54100800 傳真:86-021-54261506 手機:15021977219 15021200052 18018609966 聯系人:馬先生 郵箱:[email protected]
GoogleSitemap 網址:www.wehhzc.tw 技術支持:化工儀器網 管理登陸 ICP備案號:滬ICP備09095411號-1
點擊這里給我發消息
點擊這里給我發消息
點擊這里給我發消息

化工儀器網

推薦收藏該企業網站
什么叫做资产配置
掃一掃訪問手機站掃一掃訪問手機站
訪問手機站