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超氧陰離子清除能力檢測 說明 技術文章
點擊次數:276 發布時間:2019-06-04
  • 當前位置: 首頁 > 生理生化試劑盒 > 微量酶標儀法 > 氧化與抗氧系列 > 超氧陰離子清除能力檢測試劑盒

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超氧陰離子清除能力檢測試劑盒

商品貨號:MS1518
英文名稱:Superoxide anion scavenging capacity Assay Kit
別名:超氧陰離子清除能力試劑盒 超氧陰離子清除能力測試盒
檢測方法:微量法

 

商品貨號:商品品牌:規格基本售價選擇規格
MS1518 -100管/96樣索橋生物100管/96樣¥960.00元 

 

  • 產品詳細介紹
  •  

 

測定意義:

超氧陰離子自由基作為生物體代謝過程中產生的一種自由基,可攻擊生物大分子,如脂質、蛋白質、核酸和聚不飽和脂肪酸等,使其交鏈或者斷裂,引起細胞結構和功能的破壞,與機體衰老和病變有很密切的關系,清除超氧陰離子自由基的研究已經得到了廣泛的關注。

測定原理:

AP-TEMED系統產生超氧陰離子,與鹽酸羥胺反應生成NO2-,NO2-與對氨基苯磺酸和α-萘胺的作用生成紅色的偶氮化合物,在530nm處有特征吸收峰,樣品對超氧陰離子的清除能力與530nm的吸光值呈負相關。

 

 

  • 產品說明書

貨號:MS1518                                      規格:100 管/96 樣

超氧陰離子清除能力試劑盒說明書 微量法

注意:正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。

測定意義:

超氧陰離子自由基作為生物體代謝過程中產生的一種自由基,可攻擊生物大分子,如脂質、 蛋白質、核酸和聚不飽和脂肪酸等,使其交鏈或者斷裂,引起細胞結構和功能的破壞,與機體 衰老和病變有很密切的關系,清除超氧陰離子自由基的研究已經得到了廣泛的關注。

測定原理:

AP-TEMED 系統產生超氧陰離子,與鹽酸羥胺反應生成 NO2,NO2與對氨基苯磺酸和 α - 萘胺的作用生成紅色的偶氮化合物,在 530nm 處有特征吸收峰,樣品對超氧陰離子的清除能力 與 530nm 的吸光值呈負相關。

自備實驗用品及儀器:

天平、研缽、低溫離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96 孔板、恒溫水 浴鍋。

試劑組成和配制:

提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體 1.5mL×1 支,4℃避光保存。

試劑二:粉劑×1 瓶,4℃避光保存。臨用前加 6mL 蒸餾水充分溶解。

試劑三:液體 7.5mL×1 瓶,4℃保存。

試劑四:液體 7.5mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑五:液體 7.5mL×1 瓶,4℃避光保存。

樣品處理:

1. 組織:按照質量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g,加入 1mL 提 取液)加入提取液,冰浴勻漿后于 4℃,10000g 離心 10min,取上清置于冰上待測。

2. 細胞:按照細胞數量(104個):提取液體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細 胞加入 1mL 提取液),冰浴超聲波破碎細胞(功率 300w,超聲 3 秒,間隔 7 秒,總時間 3min); 然后 4℃,10000g 離心 10min,取上清置于冰上待測。

3. 培養液或其它液體:直接檢測。

4. 粉劑藥物可配制成相同濃度,比如 1mg/mL。 

測定操作:

              空白管   對照管   測定管

試劑一(μ L)     10      10       10

試劑二(μ L)            40       40

H2O(μ L)       65      25

        充分混勻,25℃反應 1min

樣品(μ L)                     25

試劑三(μ L)     50      50      50

試劑四(μ L)     50      50       50

試劑五(μ L)     50      50      50

          充分混勻,37℃顯色 20min,于微量石英比色皿/96 孔板,以空白管調零,在 530nm 處測定對             照管和測定管的吸光值,分別記為 A 對照管和 A 測定管。 

注意:空白管只需測定一次。 

計算公式:

超氧陰離子清除率 I%= (A 對照管 - A 測定管) / A 對照管  x100% 

注意事項:

1. 試劑一 4℃可保存 2 個月,配制好的試劑二 4℃可保存一周,建議實驗前配制,并盡快使用。

2. 樣品處理完后立即進行測定,或者低溫保存不超過 24 小時。

 

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