·加入收藏 ·詢價留言
 
首 頁 公司簡介 產品展示 公司新聞 技術文章 資料下載 人才招聘 聯系我們
產品搜索:
生化試劑
分子生物學試劑
蛋白質研究
免疫學抗體
細胞相關產品
其他試劑及產品
實驗室相關耗材
實驗室服務
sigma產品
Invitrogen
Roche產品
Biovision產品
NUNC耗材
生化檢測試劑盒(常量)
Peprotech細胞因子
OMEGA試劑盒代理
實驗室儀器
葡聚糖凝膠,瓊脂糖凝膠填料系列
中藥對照品 標準品
其他生化試劑
移液器
R&D細胞因子現貨供應
糖類中間體
原料藥
索橋生化檢測試劑(微量)
索橋生化檢測(常量)
透析膜及相關產品
地 址: 上海市徐匯區欽江路15號
郵 編: 200233
聯系人: 馬先生
電 話: 86-021-64855665/86-021-54100800
傳 真: 86-021-54261506
郵 箱: [email protected]
網 址: www.wehhzc.tw
 
塑料包裝
上海索萊寶生物科技有限公司
上海索來寶【丁香通】
上海索萊寶生技網站
上海索寶-慧聚網站
上海索寶生物阿里巴巴站
索橋生物
生技網-搜盡生命科學
索萊寶
SOLARBIO
 
   
谷胱甘肽還原酶(GR)活性測定試劑盒說明書 技術文章
點擊次數:546 發布時間:2019-06-06
  • 當前位置: 首頁 > 生理生化試劑盒 > 常量分光光度計法 > 輔酶II系列 > 谷胱甘肽還原酶(glutathione reductase, GR)活性測定試劑盒

product-view

谷胱甘肽還原酶(Glutathione Reductase, GR)活性測定試劑盒

商品貨號:QS1111
英文名稱:Glutathion Reductases(GR) Assay Kit
別名:谷胱甘肽還原酶試劑盒 GR Kit 谷胱甘肽還原酶(GR)試劑盒 谷胱甘肽還原酶(GR)測試盒
檢測方法:常量法

 

商品貨號:商品品牌:規格基本售價選擇規格
QS1111-50管/48樣索橋生物50管/48樣¥260.00元 

 

  • 產品詳細介紹

 

測定意義:

GR是廣泛存在于真核和原核生物中的一種黃素蛋白氧化還原酶,是谷胱甘肽氧化還原循環的關鍵酶之一(通常昆蟲中GR被TrxR取代)。GR催化NADPH還原GSSG生成GSH,有助于維持體內GSH/GSSG比值。GR在氧化脅迫反應中對活性氧清除起關鍵作用,此外GR還參與抗壞血酸-谷胱甘肽循環途徑。

測定原理:

GR能催化NADPH還原GSSG再生GSH,同時NADPH脫氫生成NADP+;NADPH在340 nm有特征吸收峰,相反NADP+在該波長無吸收峰;通過測定340 nm吸光度下降速率來測定NADPH脫氫速率,從而計算GR活性。

 

  •  
  • 產品說明書
  •  

貨號:QS1111                           規格:50 管/48 樣

 

谷胱甘肽還原酶(glutathione reductase, GR)活性測定試劑盒說明書

                               紫外分光光度法

 

注意:正式測定之前選擇 2-3 個預期差異大的樣本做預測定。

 

測定意義:

GR 是廣泛存在于真核和原核生物中的一種黃素蛋白氧化還原酶,是谷胱甘肽氧化還原循 環的關鍵酶之一(通常昆蟲中 GR 被 TrxR 取代)。GR 催化 NADPH 還原 GSSG 生成 GSH,有助于維 持體內 GSH/GSSG 比值。GR 在氧化脅迫反應中對活性氧清除起關鍵作用,此外 GR 還參與抗壞 血酸-谷胱甘肽循環途徑。

測定原理:

GR 能催化 NADPH 還原 GSSG 再生 GSH,同時 NADPH 脫氫生成 NADP+;NADPH 在 340 nm 有特 征吸收峰,相反 NADP+在該波長無吸收峰;通過測定 340 nm 吸光度下降速率來測定 NADPH 脫氫 速率,從而計算 GR 活性。

 

自備實驗用品及儀器:

紫外分光光度計、低溫離心機、水浴鍋、移液器、1mL 石英比色皿和蒸餾水

 

試劑組成和配置:

試劑一:液體×1 瓶,4℃保存。

試劑二:粉劑×1 瓶,4℃保存。臨用前加入 5.0 mL 蒸餾水,混勻。

試劑三:液體×1 支,4℃保存。

 

粗酶液提取:

1. 組織:按照組織質量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加 入 1mL 試劑一)進行冰浴勻漿。8000g,4℃離心 15min,取上清,置冰上待測。

2. 細菌、真菌:按照細胞數量(104個):提取液體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細胞加入 1mL 試劑一),冰浴超聲波破碎細胞(功率 300w,超聲 3 秒,間隔 7 秒,總時 間 3min);然后 8000g,4℃,離心 15min,取上清置于冰上待測。

3. 血清等液體:直接測定。

 

操作步驟:

1. 分光光度計預熱 30 min,調節波長到 340 nm,蒸餾水調零。

2. 試劑一置于 25℃(普通物質)或者 37℃(哺乳動物)中預熱 30min。

3. 空白管:取 1mL 石英比色皿,加入 850μ L 試劑一,100μ L 試劑二,50μ L 試劑三,充分混 勻,于 340nm 處測定 10 s 和 190 s 吸光度,記為 A 空 1 和 A 空 2,△A 空白管= A 空 1﹣A 空 2。

4. 測定管:取 1mL 石英比色皿,加入 750μ L 試劑一,100μ L 試劑二,100μ L 上清液,50μ L 試劑三,充分混勻,于 340nm 測定 10 s 和 190 s 吸光度,記為 A 測 1 和 A 測 2,△A 測定管= A 測 1﹣A 測 2。

注意:空白管只需要測定一次。

 

計算公式: 

(1). 按蛋白濃度計算

活性單位定義:在一定溫度中,pH8.0 條件下,每毫克蛋白每分鐘催化 1nmol NADPH 氧化為 1 個酶活單位。

GR 酶活(nmol/min/mg prot)= [ (△A 測定管-△A 空白管)÷ε ÷d×V 反總×109 ]÷[Cpr×V 樣]÷T = 536×(△A 測定管-△A 空白管)÷Cpr

(2). 按樣本質量計算

活性單位定義:在一定溫度中,pH8.0 條件下,每克樣本每分鐘催化 1nmol NADPH 氧化為 1 個 酶活單位。

GR 酶活(nmol/min/g)= [ (△A 測定管-△A 空白管)÷ε ÷d×V 反總×109 ] ÷(W×V 樣÷V 樣 總)÷T = 536×(△A 測定管-△A 空白管)÷W

(3) 按細胞數量計算

活性單位定義:在一定溫度中,pH8.0 條件下,每 104個細胞每分鐘催化 1nmol NADPH 氧化為 1 個酶活單位。

GR 酶活(nmol/min/104 cell)= [ (△A 測定管-△A 空白管)÷ε ÷d×V 反總×109 ] ÷(細胞數 量×V 樣÷V 樣總)÷T = 536×(△A 測定管-△A 空白管)÷細胞數量

(4)按液體體積計算

活性單位定義:在一定溫度中,pH8.0 條件下,每毫升液體每分鐘催化 1nmol NADPH 氧化為 1 個酶活單位。

GR 酶活(nmol/min/mL)= [ (△A 測定管-△A 空白管)÷ε ÷d×V 反總×109 ]÷×V 樣÷T = 536×(△A 測定管-△A 空白管)

ε :NADPH 摩爾消光系數 6.22×103 L/mol/cm;V 反總:反應體系總體積,1000μ L=0.001 L; 106:1 mol=1×106 μ mol; Cpr:上清液蛋白濃度(mg/mL);V 樣:加入反應體系中上清液體 積,100μ L =0.1 mL;V 樣總:加入提取液體積,1mL;W,樣本質量,g;T:反應時間,3 min。

 

注意事項:

(1)樣品處理等過程均需要在冰上進行,且須在當日測定酶活力,勻漿液避免反復凍融;

(2)試劑二須現配現用,配制完后,置于冰上,未使用完的 4℃保存,三天內使用完。

(3)測定前須先用 1~2 個樣做預實驗,確保 180s 內吸光值變化呈線性,哺乳動物組織一般 須用試劑一稀釋 2~5 倍;

(4)細胞中 GR 活性測定時,細胞數目須在 300 萬-500 萬之間,細胞中 GR 的提取時可加試劑 一后研磨或超聲波處理,不能用細胞裂解液處理細胞。

 

系列產品及單價

輔酶Ⅱ系列    
QS1100輔酶ⅡNADP(H)含量測試盒可見分光光度法50管/24樣550
MS1100輔酶ⅡNADP(H)含量測試盒微量法100管/48樣1000
QS1101NADP磷酸酶(NADPase)測試盒可見分光光度法50管/48樣520
MS1101NADP磷酸酶(NADPase)測試盒微量法100管/96樣980
QS11026-磷酸葡萄糖脫氫酶(G6PDH)/葡萄糖-6-磷酸脫氫酶測試盒紫外分光光度法50管/48樣160
MS11026-磷酸葡萄糖脫氫酶(G6PDH)/葡萄糖-6-磷酸脫氫酶測試盒微量法100管/96樣300
QS1103胞漿異檸檬酸脫氫酶(ICDHc)測試盒紫外分光光度法50管/48樣260
MS1103胞漿異檸檬酸脫氫酶(ICDHc)測試盒微量法100管/96樣500
QS1104NADP蘋果酸酶(NADP-ME)測試盒紫外分光光度法50管/48樣320
MS1104NADP蘋果酸酶(NADP-ME)測試盒微量法100管/96樣600
QS1105NAD-蘋果酸酶(NAD-ME)測試盒紫外分光光度法50管/48樣350
MS1105NAD-蘋果酸酶(NAD-ME)測試盒微量法100管/96樣650
QS11066-磷酸葡糖糖酸脫氫酶(6PGDH)測試盒紫外分光光度法50管/48樣750
MS11066-磷酸葡萄糖酸脫氫酶(6PGDH)測試盒微量法100管/96樣1400
QS1107肌酸激酶(CK)測試盒紫外分光光度法50管/48樣820
MS1107肌酸激酶(CK)測試盒微量法100管/96樣1500
QS1108-10脂肪酸合成酶(FAS)測試盒紫外分光光度法10管/9樣1200
QS1108-25脂肪酸合成酶(FAS)測試盒紫外分光光度法25管/24樣2000
QS1108-50脂肪酸合成酶(FAS)測試盒紫外分光光度法50管/48樣3200
MS1108脂肪酸合成酶(FAS)測試盒微量法100管/96樣6000
QS2508蔗糖磷酸化酶(SP)測試盒紫外分光光度法50管/48樣1600
MS2508蔗糖磷酸化酶(SP)測試盒微量法100管/96樣3000
QS1110硫氧還蛋白氧化還原酶(TrxR)測試盒可見分光光度法50管/48樣250
MS1110硫氧還蛋白氧化還原酶(TrxR)測試盒微量法100管/96樣450
QS1111谷胱甘肽還原酶(GR)測試盒紫外分光光度法50管/48樣260
MS1111谷胱甘肽還原酶(GR)測試盒微量法100管/96樣500
上海索寶生物科技有限公司 版權所有 總訪問量:1491378 地址:上海市徐匯區欽江路15號 郵編:200233
電話:86-021-64855665/86-021-54100800 傳真:86-021-54261506 手機:15021977219 15021200052 18018609966 聯系人:馬先生 郵箱:[email protected]
GoogleSitemap 網址:www.wehhzc.tw 技術支持:化工儀器網 管理登陸 ICP備案號:滬ICP備09095411號-1
點擊這里給我發消息
點擊這里給我發消息
點擊這里給我發消息

化工儀器網

推薦收藏該企業網站
什么叫做资产配置
掃一掃訪問手機站掃一掃訪問手機站
訪問手機站