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脂肪酸合成酶(FAS)活性試劑盒說明書 技術文章
點擊次數:277 發布時間:2019-06-06
  • 當前位置: 首頁 > 生理生化試劑盒 > 常量分光光度計法 > 輔酶II系列 > 脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)活性試劑盒

product-view

脂肪酸合成酶(Fatty Acid Synthase,FAS)活性試劑盒

商品貨號:QS1108
英文名稱:Fatty Acid Synthase (FAS) Assay Kit
別名:脂肪酸合成酶試劑盒 FAS Kit 脂肪酸合成酶(FAS)試劑盒 脂肪酸合成酶(FAS)測試盒
檢測方法:常量法

 

商品貨號:商品品牌:規格基本售價選擇規格
QS1108-10 管/9 樣索橋生物10 管/9 樣¥1200.00元 
QS1108-25管/24樣索橋生物25管/24樣¥2000.00元 
QS1108-50管/48樣索橋生物50管/48樣¥3200.00元 

 

  • 產品詳細介紹

 

測定意義:

FAS是脂肪酸合成關鍵酶,催化乙酰輔酶A和丙二酰輔酶A而生成長鏈脂肪酸。FAS普遍表達于各種組織細胞中,在哺乳動物肝、腎、腦、肺和乳腺以及脂肪組織中表達豐富。

測定原理:

FAS催化乙酰CoA、丙二酰CoA和NADPH生成長鏈脂肪酸和NADP+;NADPH在340nm有吸收峰,而NADP+沒有;通過測定340nm 光吸收下降速率,計算FAS活性。

 

 

  • 產品說明書

 

貨號:QS1108-50                       規格:50 管/48 樣

脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)活性試劑盒說明書 紫外分光光度法

 

注意:正式測定之前選擇 2-3 個預期差異大的樣本做預測定。

 

測定意義:

FAS 是脂肪酸合成關鍵酶,催化乙酰輔酶 A 和丙二酰輔酶 A 而生成長鏈脂肪酸。FAS 普遍 表達于各種組織細胞中,在哺乳動物肝、腎、腦、肺和乳腺以及脂肪組織中表達豐富。

 

測定原理:

FAS 催化乙酰 CoA、丙二酰 CoA 和 NADPH 生成長鏈脂肪酸和 NADP+;NADPH 在 340nm 有吸收 峰,而 NADP+沒有;通過測定 340nm 光吸收下降速率,計算 FAS 活性。

 

自備實驗用品及儀器:

研缽、冰、臺式離心機、紫外分光光度計、1mL 石英比色皿、可調式移液槍和蒸餾水。

 

試劑組成和配制:

試劑一:液體 50mL×1 瓶,-20℃保存。用前 1 d 取出置于 4℃充分解凍后混勻。

試劑二:粉劑×1 支。臨用前加入 1100 μ L 試劑四,充分溶解,用不完的試劑分裝后-20℃ 保存,禁止反復凍融。

試劑三:粉劑×1 支,4℃避光保存。臨用前加入 1100 μ L

試劑四,充分溶解,用不完的 試劑分裝后-20℃保存,禁止反復凍融。

試劑四:液體 50mL×1 瓶, 4℃保存。

試劑五:粉劑×1 瓶,4℃保存。臨用前加入 2100μ L 試劑四,充分溶解,用不完的試劑 分裝后-20℃避光保存,禁止反復凍融。

 

粗酶液提取:

1. 組織:按照組織質量(g):試劑一體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加 入 1mL 試劑一)進行冰浴勻漿。12000g,4℃離心 40min,取上清置冰上待測。

2. 細菌、真菌:按照細胞數量(104個):試劑一體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細胞加入 1mL 試劑一),冰浴超聲波破碎細胞(功率 300w,超聲 3 秒,間隔 7 秒,總時 間 3min);然后 12000g,4℃,離心 40min,取上清置于冰上待測。

3. 血清等液體:直接測定。

 

FAS 測定操作:

1. 分光光度計預熱 30min,調節波長到 340 nm,蒸餾水調零。

2. 試劑四置于 40℃水浴中預熱 30 min。

3. 測定管:在 1mL 石英比色皿中依次加入 100μ L 上清液、20μ L 試劑二、20μ L 試劑三、820μ L 試劑四和 40μ L 試劑五,迅速混勻后于 340nm 處測定吸光值,記錄第 30s 和 90s 時吸光值,分 別記錄為 A1 和 A2。△A 測=A1-A2。

 

FAS 活性計算公式:

(1)按照蛋白濃度計算 活性單位定義:37℃中每毫克蛋白每分鐘氧化 1nmol NADPH 為 1 個酶活單位。

FAS(nmol/min/mg prot) =(△A÷ε ÷d×V 反總×109 ) ÷(Cpr×V 樣)÷T =1608×△A÷Cpr

(2)按照樣本質量計算

活性單位定義:37℃中每克組織每分鐘氧化 1nmol NADPH 為 1 個酶活單位。

FAS(nmol/min/g 鮮重) = (△A÷ε ÷d×V 反總×109 ) ÷(W×V 樣÷V 樣總)÷T =1608×△A ÷W

(3)按細胞數量計算

活性單位定義:37℃中每 104個細胞每分鐘氧化 1nmol NADPH 為 1 個酶活單位。

FAS(nmol /min/104 cell) = (△A÷ε ÷d×V 反總×109 ) ÷(細胞數量×V 樣÷V 樣總)÷T =1608×△A ÷細胞數量

(4)按液體體積計算

活性單位定義:37℃中每毫升樣本每分鐘氧化 1nmol NADPH 為 1 個酶活單位。

FAS(nmol /min/mL) =(△A÷ε ÷d×V 反總×109 ) ÷V 樣÷T =1608×△A

ε :NADPH 摩爾消光系數,6.22×103 /mol/cm;d:比色皿光徑,1 cm;V 反總:反應體系總體 積,1000μ L=0.001 L;Cpr:上清液蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本質量,g;V 樣:加入反應 體系中上清液體積,100μ L=0.1 mL;T:反應時間,1min。

 

系列產品及單價

輔酶Ⅱ系列    
QS1100輔酶ⅡNADP(H)含量測試盒可見分光光度法50管/24樣550
MS1100輔酶ⅡNADP(H)含量測試盒微量法100管/48樣1000
QS1101NADP磷酸酶(NADPase)測試盒可見分光光度法50管/48樣520
MS1101NADP磷酸酶(NADPase)測試盒微量法100管/96樣980
QS11026-磷酸葡萄糖脫氫酶(G6PDH)/葡萄糖-6-磷酸脫氫酶測試盒紫外分光光度法50管/48樣160
MS11026-磷酸葡萄糖脫氫酶(G6PDH)/葡萄糖-6-磷酸脫氫酶測試盒微量法100管/96樣300
QS1103胞漿異檸檬酸脫氫酶(ICDHc)測試盒紫外分光光度法50管/48樣260
MS1103胞漿異檸檬酸脫氫酶(ICDHc)測試盒微量法100管/96樣500
QS1104NADP蘋果酸酶(NADP-ME)測試盒紫外分光光度法50管/48樣320
MS1104NADP蘋果酸酶(NADP-ME)測試盒微量法100管/96樣600
QS1105NAD-蘋果酸酶(NAD-ME)測試盒紫外分光光度法50管/48樣350
MS1105NAD-蘋果酸酶(NAD-ME)測試盒微量法100管/96樣650
QS11066-磷酸葡糖糖酸脫氫酶(6PGDH)測試盒紫外分光光度法50管/48樣750
MS11066-磷酸葡萄糖酸脫氫酶(6PGDH)測試盒微量法100管/96樣1400
QS1107肌酸激酶(CK)測試盒紫外分光光度法50管/48樣820
MS1107肌酸激酶(CK)測試盒微量法100管/96樣1500
QS1108-10脂肪酸合成酶(FAS)測試盒紫外分光光度法10管/9樣1200
QS1108-25脂肪酸合成酶(FAS)測試盒紫外分光光度法25管/24樣2000
QS1108-50脂肪酸合成酶(FAS)測試盒紫外分光光度法50管/48樣3200
MS1108脂肪酸合成酶(FAS)測試盒微量法100管/96樣6000
QS2508蔗糖磷酸化酶(SP)測試盒紫外分光光度法50管/48樣1600
MS2508蔗糖磷酸化酶(SP)測試盒微量法100管/96樣3000
QS1110硫氧還蛋白氧化還原酶(TrxR)測試盒可見分光光度法50管/48樣250
MS1110硫氧還蛋白氧化還原酶(TrxR)測試盒微量法100管/96樣450
QS1111谷胱甘肽還原酶(GR)測試盒紫外分光光度法50管/48樣260
MS1111谷胱甘肽還原酶(GR)測試盒微量法100管/96樣500
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