·加入收藏 ·詢價留言
 
首 頁 公司簡介 產品展示 公司新聞 技術文章 資料下載 人才招聘 聯系我們
產品搜索:
生化試劑
分子生物學試劑
蛋白質研究
免疫學抗體
細胞相關產品
其他試劑及產品
實驗室相關耗材
實驗室服務
sigma產品
Invitrogen
Roche產品
Biovision產品
NUNC耗材
生化檢測試劑盒(常量)
Peprotech細胞因子
OMEGA試劑盒代理
實驗室儀器
葡聚糖凝膠,瓊脂糖凝膠填料系列
中藥對照品 標準品
其他生化試劑
移液器
R&D細胞因子現貨供應
糖類中間體
原料藥
索橋生化檢測試劑(微量)
索橋生化檢測(常量)
透析膜及相關產品
地 址: 上海市徐匯區欽江路15號
郵 編: 200233
聯系人: 馬先生
電 話: 86-021-64855665/86-021-54100800
傳 真: 86-021-54261506
郵 箱: [email protected]
網 址: www.wehhzc.tw
 
塑料包裝
上海索萊寶生物科技有限公司
上海索來寶【丁香通】
上海索萊寶生技網站
上海索寶-慧聚網站
上海索寶生物阿里巴巴站
索橋生物
生技網-搜盡生命科學
索萊寶
SOLARBIO
 
   
bradford法原理及bradford法測蛋白濃度實驗步驟
點擊次數:3303 發布時間:2016-01-29
 

bradford法原理及bradford法測蛋白濃度實驗步驟

    Bradford法是一種迅速、可靠的通過染色測定溶液中蛋白濃度的方法。又稱作考馬斯亮藍法。是1976年由Bradford建立。是根據蛋白質與燃料相結合的原理設計的。

    具體Bradford法檢測原理: Bradford與蛋白質四級結構,特殊氨基酸結合,由棕色變成藍色,595nm檢測.該方法用于大多數蛋白質的定量是比較的,但不使用于小分子堿性多肽的定量,如核糖核酸酶或溶菌酶,去污劑的濃度超過0.2%影響測定結果,如TritonX-100,SDS,NP-40等.

操作Bradford法的實驗步驟:

1、Bradford法濃染液的配制:將100mg考馬斯亮藍G-250溶于50ml 95%乙醇,加入100ml濃磷酸;然后,用蒸餾水補充至200ml;此染液放4℃至少6個月保持穩定。

2、標準曲線蛋白質樣本的制備:盡量使用與待測樣本性質相近的蛋白質作為標準品,例如測定抗體,可用純化的抗體作為標準,如果待測樣品是未知的,也可用抗體作為標準蛋白,通常在20μg -150μg/100μl之間繪制標準曲線。

3、將待測樣本溶于100μl緩沖溶液中,該緩沖溶液相同(好用PBS) 。

4、按照1:5用水稀釋濃燃料結合溶液,如果出現沉淀,過濾除去。

5、每個樣品家5ml稀釋的燃料結合溶液,作用5-30分鐘,燃料與蛋白結合,將由紅色變為蘭色,在595nm波長下測定其吸光度,注意顯色反應不超過30分鐘。

6、根據標準曲線計算待測樣品的濃度。

 
上海索寶生物科技有限公司 版權所有 總訪問量:1492814 地址:上海市徐匯區欽江路15號 郵編:200233
電話:86-021-64855665/86-021-54100800 傳真:86-021-54261506 手機:15021977219 15021200052 18018609966 聯系人:馬先生 郵箱:[email protected]
GoogleSitemap 網址:www.wehhzc.tw 技術支持:化工儀器網 管理登陸 ICP備案號:滬ICP備09095411號-1
點擊這里給我發消息
點擊這里給我發消息
點擊這里給我發消息

化工儀器網

推薦收藏該企業網站
什么叫做资产配置
掃一掃訪問手機站掃一掃訪問手機站
訪問手機站